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食蟹猴和恒河猴SARS感染模型

(1)復制方法  年齡為3~6歲的健康恒河猴(Rhesus macaques)和食蟹猴(M. fascicularis),按0.15ml/kg體重的劑量經肌肉注射速眠新麻醉,然后經鼻內和氣管內感染SARS- CoV BJ01株(10的5.7次方TCID50/ml)。模型動物在攻毒后第2、5、7日的咽拭子均分離出病毒,經**熒光鑒定為SARS病毒。部分感染猴的肺部有出血點或出血斑。所有感染猴均可出現不同嚴重程度的多灶性單核細胞性間質性肺炎,表現為肺泡間隔增寬、出血、滲出,肺泡腔內有脫落的肺泡上皮細胞和巨噬細胞,小支氣管和細支氣管也有上皮細胞脫落;部分肺泡間隔出現少量以**細胞為主的炎癥細胞浸潤,肺泡腔內偶見透明膜形成。**組化可在肺泡巨噬細胞和Ⅰ型上皮細胞中檢測到SARS病毒抗原。感染動物尸檢中,在支氣管**結和心肌中均能檢測到病毒RNA,并有炎癥改變。多數模型動物出現多灶性**細胞性感染為主的肝炎,并伴有個別肝細胞壞死。

(2)模型特點  模型動物感染后出現病理學的改變,肺臟是病毒感染的主要靶器官,各肺葉均可見彌漫性肺泡損傷,形成透明膜,出現單核細胞浸潤。通過病毒學檢測及**學方法可從模型動物血、咽拭子、肺泡上皮細胞和支氣管**結等組織樣品中檢測到SARS病毒RNA,說明病毒能在非靈長類動物體內復制;并且有機體體液和細胞**應答。部分感染猴的白細胞和血小板數量從感染第3日起出現一過性的降低,然后逐漸恢復到正常的水平;動物體內產生SARS病毒的專一性抗體,感染后第2、3、4周的血清抗 SARS-CoV特異性抗體水平均較高。由此可見,恒河猴可作為SARS病毒感染的動物模型,適用于SARS發病機制、**篩選、疫苗評價的研究。

(3)比較醫學  所有感染猴均未觀察到如高熱、干咳、昏睡、一過性的皮疹和呼吸困難等SARS典型臨床癥狀,有2/3的恒河猴出現一過性的低熱;而所有食蟹猴的體溫均在正常的范圍內波動。但感染猴的肺組織病理變化,如彌漫性肺泡損傷、單核細胞浸潤等均與人類感染SARS冠狀病毒后的肺組織病變基本類似,且病理變化較人類輕。感染后模型動物體內可產生SARS專一性抗體,感染4周左右時其血清中的抗體水平較高,這與人類SARS患者相同;SARS患者體內產生的特異性IgM抗體,從7d開始出現至第11日可達到高峰;而IgG抗體則于10d后產生,至20d達到高峰;同時從感染猴的組織和分泌物中分離到病毒。總之,恒河猴感染SARS病毒的病理學改變與人類感染SARS病毒后出現的病理改變十分相似,且非人靈長動物具有與人相似的遺傳背景,所以可成為較為理想的SARS動物模型。但受到客觀條件的限制,猴無法在大規模的研究中使用,這種限制降低了本模型的應用價值。

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